對于檢測試劑盒試驗(yàn)室科研工作者來說，試驗(yàn)細(xì)節(jié)使非常重要的。在ELISA試劑盒試驗(yàn)中的各項(xiàng)操作細(xì)節(jié)有許多，如盡量少用排槍、勤換槍頭，加樣時(shí)由低濃度向高濃度加，因?yàn)檫@樣能夠削減跳孔的幾率。
檢測試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，往預(yù)先包被SRB捕獲抗體的包被微孔中，依次加入檢測抗體，經(jīng)過溫育并*的清洗。用底物TMB著色，TMB會(huì)在過氧化物酶的作用下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的SRB呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度，計(jì)算樣品濃度。
檢測試劑盒的樣品收集、保存方法及處理辦法：
1、血清：采用的是不含內(nèi)毒素和熱原的試管，操作過程中要注意不能受到任何細(xì)胞刺激，收集血液后，檢測試劑盒使用離心機(jī)3000轉(zhuǎn)功率10分鐘將血清和紅細(xì)胞小心且迅速地分離。
2、血漿：EDTA、肝素抗凝和檸檬酸鹽。使用離心機(jī)3000轉(zhuǎn)功率工作30分鐘后取上清。
3、細(xì)胞上清液：使用離心機(jī)3000轉(zhuǎn)功率工作10分鐘去除聚合物和顆粒。
4、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。使用離心機(jī)3000轉(zhuǎn)功率工作10分鐘取上清。
5、保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分開手機(jī)保存，存放于-20℃的環(huán)境之中，避免反復(fù)凍融，在室溫下進(jìn)行解凍樣品。
