產(chǎn)品介紹

肺炎衣原體IgM檢測試劑盒（以色列 Savyon）

產(chǎn)品用途：肺炎衣原體IgM盒采用酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）檢測人血清中CPAb-IgM。

本試劑適用于肺炎衣原體感染的早期診斷。僅供體外診斷。

產(chǎn)品介紹：

肺炎衣原體（TWAR組）感染后會引發(fā)上、下呼吸道炎癥，如咽炎、鼻竇炎、急性支氣管炎等。但多數(shù)人癥狀較輕或無癥狀，不加治療和延緩治療的病情會嚴(yán)重。肺炎衣原體感染者血清檢測陽性結(jié)果表明兒童含量較低，隨年齡逐漸增加，在中年達(dá)到高。樣本的采集和患者適時的血清學(xué)檢驗會影響到檢驗結(jié)果。一般情況血清IgM在肺炎衣原體感染后2-4周出現(xiàn)，然后IgG和IgA在6-8周出現(xiàn)。IgM一般在2-6個月后*消失。IgG通常緩慢減少。IgM是早期診斷的依據(jù)。

實驗原理：

將肺炎衣原體包被于微孔板→加入血清,使得抗原抗體結(jié)合→37℃育溫1小時→洗去未結(jié)合的抗體→加入酶結(jié)合物→37℃育溫1小時→洗去酶結(jié)合物→加入底物→加入終止液450nm→讀取吸光值→結(jié)果計算

實驗流程：2×50ul陰性對照、1×50ul陽性對照和稀釋后的樣本加入到微孔板里→37C育溫1小時→洗液洗滌3次→加入50ulHRP酶結(jié)合物→37℃育溫1小時→洗液洗滌3次→加入100ulTMB底物→室溫平衡15分鐘→加入100ul終止液→450nm讀取吸光度→計算結(jié)果

試劑盒組成：

1、包被肺炎衣原體的微孔板      1×96

2、濃縮洗液（20倍稀釋）       100ml

3、樣本稀釋液（紅蓋）          60 ml

4、酶稀釋液（綠蓋）            40ml

5、陰性對照                    1.25ml

6、陽性對照                    0.75ml

7、酶結(jié)合物                    0.2ml

8、底物                        14ml

9、終止液                      15ml

10、封膜                       1張

11、說明書                     1份

所需其他材料：

1．干凈工作臺

2．用于稀釋酶結(jié)合物的塑料桶

3．移液器5-50ul、50-200ul和200-1000ul及吸頭若干

4．1L的容量瓶

5．50ul的量筒

6．洗瓶

7．吸光度值

8．振蕩器1個

9．37℃恒溫箱1個

10．酶標(biāo)儀1個

11．蒸餾水

注意事項：

本品僅供體外診斷使用。

1．本試劑盒生物學(xué)安全性遵照FDA/CE推薦方法檢測HBV/HCV/HIV1/HIV2均陰性。

2．底物對皮膚和粘膜有損害避免接觸。

3．在有效期內(nèi)使用本試劑盒，不同批次的試劑盒禁止交叉使用。

4．終止液對眼睛和皮膚有損傷，一旦濺入眼睛，用大量清水沖洗并遵循醫(yī)囑。

儲存條件：

1．試劑盒2～8℃保存，試驗完畢立即放入冰箱，禁止冰凍。

2．試劑盒一旦拆封，務(wù)必于90天內(nèi)用完。

3．洗液現(xiàn)配現(xiàn)用，如一次性配完，2～8℃保存21天。

4．標(biāo)本2～8℃可以保存7天，如需保存7天以上，則需-20℃保存。 

操作步驟：

試劑準(zhǔn)備：

1．所有試劑使用前混勻并平衡至室溫。

2．洗液20倍稀釋：如50ul濃縮洗液加入950ml水。酶結(jié)合物1:300稀釋（如10ul加入300ul的稀釋液）。

3．血清樣本1:105稀釋，如加入5ul的血清，加520ul的樣本稀釋液，或者采用兩步法稀釋，加入10ul病人血清，加入200ul樣本稀釋液，取出該稀釋后的溶液25ul，再加入100ul的樣本稀釋液（陰性、陽性和標(biāo)準(zhǔn)品按以上比例稀釋）。

4．每孔加入50ul的稀釋后的液體（空白孔加入樣本稀釋液）。

5．封膜后，37℃育溫1小時，拍干液體。

6．用稀釋后的洗液每孔300-350ul洗滌3次。

7．拍干后加入酶結(jié)合物的稀釋液50ul。

8．封膜后，37℃育溫1小時，拍干液體。

9．重復(fù)第6步。

10．加入100ul底物，室溫放置15分鐘。

11．加入終止液100ul。

12．30分鐘內(nèi)檢測450/620nm檢測吸光度。 

檢測的有效性：

檢測結(jié)果必須符合下列條件，否則重新測試。

1．陽性對照吸光度值必須≥0.8（450nm讀取吸光度）

2．陰性對照的平均值必須0.1＜NC≤0.4（450nm讀取吸光度）

結(jié)果計算：

樣本的吸光值（COV）和吸光指數(shù)(COI)的換算：

COV等于NC×2

NC=兩個陰性孔的吸光度的平均值。

表1：結(jié)果判斷

為了更準(zhǔn)確地做出對患者感染情況的評價，應(yīng)測試IgM、 IgG、IgA下表是三者與疾病診斷的依據(jù)和判定結(jié)果。

方法的局限性：本方法測試結(jié)果只做臨床參考，應(yīng)結(jié)合臨床表現(xiàn)作出診斷。

肺炎衣原體早期感染者抗體含量較少，如有懷疑2～4周后重新測試結(jié)果。

該說明書由廣州健侖生物科技有限公司技術(shù)人員編譯，僅供參考，請以原版英文說明書為準(zhǔn)!

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