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【產(chǎn)品名稱】
通用名 ：細菌DNA/RNA提取試劑盒（吸附柱法）
Name ：DNA Extraction Kit（Adsorption column method）
【產(chǎn)品介紹】
本試劑盒可以從多種樣本中提取基因組DNA，包括動物內(nèi)臟、肌肉組織、血液以及培養(yǎng)的細胞和細菌等。本法基于對基因組DNA具有高度選擇性的高分子膜材料，只需幾個步驟即可完成提取過程，在30分鐘內(nèi)完成高純度DNA的提取。
本試劑盒提取的DNA可以用于Real-time PCR、測序等分子生物學實驗。
【產(chǎn)品原理】
動物內(nèi)臟、肌肉組織、血液以及培養(yǎng)的細胞和細菌等樣本在裂解液和蛋白酶K的作用下破碎并可使大部分蛋白質(zhì)變性，釋放出基因組DNA。在其所提供的合適的鹽離子和pH環(huán)境的作用下，與乙醇混合后，基因組DNA特異性地結合于膜上，大部分蛋白質(zhì)及其他雜質(zhì)在兩次洗滌過程中被洗下，而DNA與膜結合牢固，在洗脫液的作用下被洗下。
【試劑組成】
名 稱 | 規(guī)格 |
蛋白酶K | 0.5mL |
裂解液 | 10.0mL |
去蛋白漂洗液 | 11.825mL（使用前加入15.675mL無水乙醇） |
洗滌液 | 11.55mL（使用前加入26.95mL無水乙醇） |
洗脫液 | 10.0mL |
吸附柱 | 50只 |
使用說明書 | 1份 |
【試劑規(guī)格】50 T/盒。
【儲存運輸】蛋白酶K保存于2~8℃。其余成分可室溫儲存。保存得當可穩(wěn)定使用18個月。
【自備材料】
滅菌的1.5mL離心管、各種規(guī)格滅菌的槍頭、離心機（大轉(zhuǎn)速不小于14,000rpm）、無水乙醇、漩渦震蕩器等。
細菌DNA/RNA提取試劑盒【操作步驟】
蛋白酶K放于2~8℃冰箱保存，使用時取出。
（1）全血：
a）如果全血體積大于200μL，請先使用紅細胞裂解液或淋巴細胞分離液收集細胞，然后用200μL PBS緩沖液或生理鹽水充分重懸，進行步驟2。
b）如果樣本不足200μL，可以加入適量的PBS緩沖液或者生理鹽水補足200μL，進行步驟2。
c）從人血液中提取DNA的方法與從哺乳動物血液中提取DNA的方法相同。
d）從鳥類血液中提取的DNA需將不多于20μL血液樣本，加PBS緩沖液至200μL，混合后開始提取，進行步驟2。
（2）組織樣本：
每份組織分別從不同的三個位置稱取1g，用手術剪剪碎混勻后取約50mg置于研磨器中，加入0.5mL-1mL生理鹽水研磨，勻漿后轉(zhuǎn)入1.5mL滅菌的離心管，8000rpm離心2分鐘，取上清200μL加入1.5mL離心管，進行步驟2。
（3）培養(yǎng)的細胞：
懸浮細胞：細胞培養(yǎng)液3000rpm離心2分鐘，去上清，收集2×106個細胞（容積200μL），轉(zhuǎn)移至1.5mL離心管，進行步驟2。
貼壁細胞：去上清，收集2×106個細胞（容積200μL），轉(zhuǎn)移至1.5mL離心管，進行步驟2。
（4）其他液體樣本：
1000rpm離心2分鐘 ，棄上清，收集沉淀，進行步驟2。
（5）菌液：
培養(yǎng)的菌液，5000rpm離心1分鐘，棄上清，收集至少2×106個細菌，進行步驟2。
【注意事項】
1. 本試劑盒適用于不多于200μL的全血基因組提取，大于200μL的血液建議用紅細胞裂解液或淋巴細胞分離液處理后將白細胞富集，然后進行后續(xù)操作。
2. 適用于從動物內(nèi)臟、肌肉組織、血液，以及培養(yǎng)的細胞和細菌等樣本提取DNA。
3. 新鮮血液存放于2-8℃中或者-20℃保存。
4. 提取的DNA含量少或者基本沒有的原因：
1）樣本中細胞過少；2）蛋白酶K沒有保存在2-8℃，活性降低。
5．提取鳥類血液時，將樣本、蛋白酶K和裂解液混合后液體非常粘稠，需減少樣本使用量，20μL鳥類血液加入PBS緩沖液稀釋至200μL。
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